德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS STED

德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS STED  納米顯微鏡

更快了解真實的世界

我們的 STED 技術與 STELLARIS 平臺相結合，為您整合提供超越衍射極限的成像方法。 以令人驚嘆的圖像質(zhì)量和分辨率迅速獲得優(yōu)良的納米顯微成像，同時還保護您的樣本。德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS STE 納米顯微鏡超高分辨率可以讓您同時觀察多個動態(tài)事件，研究細胞環(huán)境中的分子關系和機制。

STED 和 STELLARIS 無縫集成，您只需點擊幾下即可直接通過共聚焦界面輕松使用 STED。 現(xiàn)在，您可以從樣本中獲得更豐富的信息，因為每一個細節(jié)都很重要。

STED 和 STELLARIS： 重新設計超高分辨率

同一臺設備中的 STED 和 STELLARIS 不僅為您提供出色的共聚焦能力，還可以讓您通過超高分辨率獲得深度樣本信息。

洞察力

得益于我們的二代白激光、優(yōu)化的光路、快速 Power HyD 檢測器和多達3條STED激光譜線的組合，您可在納米級別上以及整個光譜范圍內(nèi)同時研究多個事件和分子相互作用。

高潛力

TauSTED 是我們新開發(fā)的基于熒光壽命的 STED 方法，可提供圖像質(zhì)量和溫和的活細胞成像條件，將 STED 超高分辨率成像提升到更高水平。

生產(chǎn)力

通過全新的 ImageCompass 用戶界面可輕松獲得令人驚嘆的共聚焦和 STED 圖像，只需點擊幾次即可設置好實驗。

共聚焦TauSTED

STELLARIS STED 

STELLARIS 提供兩種方法將 STED 集成到您的系統(tǒng)中：

STELLARIS STED 是一站式 STED 解決方案

STELLARIS 8 STED 則是我們的可升級系統(tǒng)

兩者在 STED 性能方面都具有相同的優(yōu)勢，因此您可以在決定哪一個符合您的需求時重點考慮 STELLARIS 的額外功能。

搭載在STELLARIS 上的 STED 性能強大，可提供2D和3D納米顯微成像，STED 激光譜線多達3條

白激光的激發(fā)光波長從440納米到790納米

可選擇 Power HyD S、HyD X 和 HyD R 用于紅光擴展應用

TauSTED 采用 TauSense 技術，或者與 FALCON 結合可進行全面的 FLIM 分析

可升級其他功能模塊（FALCON、FCS）

性能強大，可觀察到樣本的更多細節(jié)、解析樣本中的分子間關系

為了了解細胞轉運、分化和細胞 分裂等過程背后的機制，您需要在細胞原生環(huán)境中獲得盡可能好的圖像質(zhì)量、靈活設計實驗以及 快速觀察特定的生物分子。

由于與 STELLARIS 平臺相結合，STED 受益于我們的二代白激光（WLL）/AOBS技術、新優(yōu)化的光路、Power HyD 檢測器系列的光譜檢測 以及多條 STED 激光譜線（592、660、775納米）。 STED 提供明亮的圖像，展現(xiàn)出納米級細節(jié)的結構特征，使您能夠極其靈活地選擇熒光團，跟蹤高度動態(tài)的過程。

STED 用于瘧疾研究： 3D STED 775 能夠揭示裂殖體侵入紅細胞的機制。 圖像顯示了 RON4（紫色）與蛋白 PfRh5（左側，綠色）、PfRipr（中間，綠色）、PfCyRPA（右側，綠色）的疊加。 藍色是細胞核，灰色是紅細胞膜。 比例尺： 1微米。 圖片由澳大利亞沃爾特和伊麗莎·霍爾醫(yī)學研究所的 Jennifer Volz 和 Alan Cowman 以及德國歐洲分子生物學實驗室的 Marko Lampe 提供。

增加在納米級別上可同時研究的目標數(shù)量

多色熒光標記能夠揭示細胞內(nèi)物質(zhì)之間的關系，因為您可以對具有分子特異性的不同組分成像。

STED 和 STELLARIS 特別適合多色應用。 您可以在光譜的紅光區(qū)域使用優(yōu)選染料，在綠光區(qū)域選擇熒光蛋白，或在橙光區(qū)域使用新型熒光探針。 您可以進行多種熒光共定位研究，以超衍射極限的細節(jié)進行解析。

我們的光譜檢測技術可提供多達5個支持 STED 的 Power HyD 探測器，可讓您增加需要在時間和空間上定位的目標的數(shù)量。 此外，Power HyD檢測器的數(shù)字化功能、速度以及1.5納秒全系統(tǒng)死區(qū)時間可保證您在信噪比和背景方面獲得出色的圖像質(zhì)量，同時光子收集/像素停留時間比 APD 至少多10倍。

STED 用于發(fā)育生物學：果蠅胚胎全標本制備中 RNA 的 smFISH*。 探針被直接標記，沒有信號放大。 上圖： 三色 TauSTED 775 可捕獲 hb CalFluor 610（青色）、gt Quasar 670（綠色）和 eve Quasar 705（紫色）的信號。 下圖：整個果蠅胚胎的共聚焦成像。 樣本由英國曼徹斯特大學 Tom Pettini 提供。*單分子原位雜交

具有出色亮度和分辨率的2D和3D STED 成像

使用 STED 和 STELLARIS，您在2D和3D圖像中都可以獲得所需的結果，因為分辨率可在x、y和z軸上調(diào)節(jié)。 為確保您在2D和3D中獲得理想的亮度和分辨率，我們?yōu)槟峁﹥?yōu)化的光學器件，確保整個光譜中激發(fā)光和 STED激光的PSF疊加， 并且不會因自適應校正而失去定量分析能力。 我們專門開發(fā)了 STED WHITE 物鏡，確保為各種 STED 實驗提供優(yōu)化條件：

STED WHITE 100x 油鏡專門用于提升分辨率，為日常的固定樣本成像提供出色的性能

STED WHITE 93x 甘油物鏡采用 motCORR 全電動校正環(huán)技術，深度觀察樣本時可針對溫度變化、折射率失配和不均勻性進行自適應校正

如前所述，使用 motCORR 的 STED WHITE 86x 水介質(zhì)物鏡也可進行自適應校正，是溫和的活細胞應用以及 STED-FCS 的理想選擇 (1)。

(1) High photon count rates improve the quality of super-resolution fluorescence fluctuation spectroscopy，作者 F. Schneider 等， J. Phys D: Appl. Phys. 53 164003, 2020。

STED 用于細胞生物學： 3D TauSTED 660 可揭示核孔（NPC）在 COS7 細胞中的分布，實驗用 AF555 標記Nup 復合物 。 一抗 mAb414 可識別核孔籃的幾個核孔蛋白并形成點狀染色。 圖像大?。?12微米，z軸彩色編碼。

TauSTED： 納米顯微成像與熒光壽命

我們專有的 TauSTED 技術可提供出色的分辨率、圖像質(zhì)量和樣本保護，大大擴展了 STED 實驗的潛力。

TauSTED 利用 STED 所引起的熒光壽命梯度將來自 STED 過程和來自背景的光子進行區(qū)分。 因此，您可以顯著減少光劑量，獲得超越傳統(tǒng) STED* 的成像分辨率，實現(xiàn)長時間的延時活細胞納米顯微成像。

您可以將 TauSTED 用于所有 STED 實驗，特別是多色熒光共定位研究。 您還可以使用 FALCON 分離光譜重疊的 STED 染料。

*分辨率<30納米（橫向）以及<100納米（軸向），取決于樣本和熒光團。

共聚焦TauSTED

TauSTED 可在極低的光劑量下提供出色的分辨率

當您為 STED 實驗尋找低照明策略時，有一個關鍵問題： 多低才算低？ 這個問題并不容易回答，因為這取決于您選擇的樣本和熒光團。

我們不會隨意做出與您的具體實驗不相關的光劑量減少承諾。 我們能做的是向您展示 TauSTED 可顯著減少激發(fā)光和 STED 光劑量，使您可以成功地在時間和空間上進行測量。 TauSTED 可幫助您消除背景，達到理想分辨率，避免高補償劑量，避免失去定量分析能力。

這些優(yōu)勢都源自于 STED 與我們 STELLARIS 平臺功能的組合：超快速 Power HyD 檢測器以及 TauSense（STELLARIS STED和STELLARIS 8 FALCON）和 FLIM（STELLARIS 8 FALCON）提供的熒光壽命維度。

STED 用于細胞生物學： TauSTED 660 可揭示核孔（NPC）在 COS7 細胞中的分布，實驗用 AF555 標記Nup 復合物 。 只需2%的 STED 光即可顯示出更多細節(jié)。 一抗 mAb414 可識別核孔籃的幾個核孔蛋白并形成點狀染色。

使分辨率超越傳統(tǒng)極限

TauSTED 可測量每個 STED 實驗中采集的基于熒光壽命的信息，并實時測定熒光團的 STED 響應。 無論您使用哪種激發(fā)光和 STED 譜線（592、660、775），這些信息都能讓您提高圖像質(zhì)量（信噪比），利用物理原理消除背景中的光子，使分辨率超越基于強度的STED。

TauSTED 能夠自動完成所有這些功能，使您可以專注于樣本，觀察那些在一般情況下容易丟失的細節(jié)。

STED 和 DNA 折紙術成像： TauSTED 775 對標稱尺寸為23納米的 GATTA-Bead R 的解析分辨率小于30納米。 比例尺： 1微米。

溫和 STED 超高分辨率用于活細胞擴展成像

較低的激發(fā)光和 STED 光劑量有利于保護樣本。

這種能力有助實現(xiàn)更長時間的延時實驗，即更多幀數(shù)或更大體積的成像，同時不降低空間分辨率。

STED 用于細胞生物學： 溫和活細胞 TauSTED 592 對穩(wěn)定表達 LifeAct-mNeonGreen 的細胞成像。 比例尺： 5微米。 這里的延時成像以1幀/秒的速度采集230幀。 樣本由瑞士伯爾尼大學的 Max Heydasch 提供。

使用 STED-FLIM 分離具有重疊光譜的不同熒光

在 STELLARIS 上組合使用 STED 和 FALCON 模態(tài)時，可以用推薦 STED 熒光團（遠紅發(fā)射）進行多色超高分辨率解析，因為您可以使用不同種類的熒光壽命將其分離。

這些熒光團的發(fā)射光譜嚴重重疊，無法通過傳統(tǒng)的強度采集方法進行區(qū)分。 STED-FLIM 與我們的自動相量分離技術相結合，可通過這些熒光團的壽命和單個檢測器清楚地將它們分離。

STED-FLIM 用于細胞生物學： STED 775 和 FALCON 自動相量分離技術可以利用不同熒光的壽命來分離具有重疊光譜的熒光種類。 在標記了波形蛋白和肌動蛋白的 HEK 細胞中，單純的光子計數(shù)強度信息（灰色）顯示兩種結構沒有區(qū)別，而 STED-FLIM （綠色，波形蛋白AF647；紫色，Actin ATTO 647N-phalloidin）可以明顯區(qū)分它們。 比例尺： 4微米。 樣本由德國杜塞爾多夫 CAI 的 Sebastian H?nsch 和 Stephanie Weidtkamp-Peters 提供。

易于設置 STED，提高工作效率

STELLARIS 可以讓新手和專家都能輕松獲得 STED圖像。 現(xiàn)在，您只需點擊幾下鼠標即可設計共聚焦和多色組合實驗以及2D和3D STED。

ImageCompass 專注于樣本特征，能夠智能引導您獲得可信的結果。

一鍵式光束自動對準，保護您的樣本免受過度光照，全自動匹配染料理想的激發(fā)波長，確保優(yōu)化的 STED 性能。

使用 LAS X Navigator 對大面積區(qū)域快速成像，并選擇您感興趣的區(qū)域進行 STED 成像。

通過 STELLARIS 功能，例如訪問原始數(shù)據(jù)和快速高效光子計數(shù)，可驗證您的結果。

STELLARIS 上用于 STED 的 ImageCompass 用戶界面。

在同一個平臺上快速驗證結果

STED 和 STELLARIS 的組合意味著您可以驗證您的發(fā)現(xiàn)，因為 STED、共聚焦、LIGHTNING 和 TauSense 數(shù)據(jù)都在同一個系統(tǒng)中。

這種組合還意味著您可以訪問您的原始數(shù)據(jù)進行定量分析。 TauSTED 技術可以從熒光壽命信息的物理讀數(shù)中除去背景信息以及調(diào)節(jié)分辨率。

使用 STELLARIS，您始終能夠控制納米顯微成像實驗。