激光共聚焦顯微鏡在生物學上的應用
1.適用于細胞生物學、細胞生理學、神經生物學和神經生理學等幾乎所有涉及細胞研究領域。
2.對活細胞進行無損傷性的實時觀察分析,進行形態(tài)和功能相結合的研究。對細胞檢測無損傷、、可靠和優(yōu)良重復性;數(shù)據(jù)圖象可及時輸出或長期儲存。
3.對活細胞和組織或細胞組織切片進行連續(xù)斷層掃描,能獲得精細的單個細胞或一群細胞或所觀察的局部組織的各個層面結構(二維和三維)(包括細胞特異結構-如細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系統(tǒng),樣品的深層結構)和完整的三維圖像(如分析隨時間變化,即四維圖象,也可進行隨熒光波長變化的圖象,即可達到更多維的圖象)。定位組織細胞及其他所需要觀察的對象結構的空間位置,進行實時動態(tài)的觀察、分析和記錄;分析的定性、定量、定時和定位分布。
4.熒光標記探針標記的活細胞或切片標本的細胞生物物質,膜標記、細胞示蹤、免疫物質、免疫反應、受體或配體,核酸等觀察;可以在同一張樣品上進行同時多重物質標記,同時觀察。
5.細胞內離子熒光標記,單標記或多重標記,檢測細胞內如pH和鈉、鉀、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及其動態(tài)變化;
6.細胞膜電位測量,自由基的檢測等;
7.進行定位的熒光漂白恢復實驗,結合熒光漂白中熒光丟失實驗,研究細胞間通訊和其他有關細胞內物質(分子等)的運動;在時間掃描實驗和光漂白(光淬滅)實驗中,可同時對每個通道的數(shù)據(jù)和圖象進行同時輸出和轉換。進行熒光共振能量轉移實驗,通過熒光波長的變化,研究細胞內分子、離子的運動,相互作用。
8.有非常(空間定位、定量、定波長、定時間)、靈敏、快速和能在同一時間內完成對細胞組織多重熒光標記(即使是發(fā)射波長非常接近,比如相差只有數(shù)nm的多重熒光)的各種波長圖象的分離和觀察分析,以及多重熒光標記共定位等的在線測量分析功能
激光共聚焦顯微鏡在生物領域的*性
與傳統(tǒng)光學顯微鏡相比, 激光共聚焦顯微鏡 具有更高的分辨率,實現(xiàn)多重熒光的同時可觀察并可形成清晰的三維圖像等優(yōu)點,在對生物樣品的觀察中, 激光共聚焦顯微鏡 有如下*性:
1、對活細胞組織或細胞切片進行連續(xù)掃描,可獲得精細的細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系統(tǒng)的三維圖像。
2、可以得到比普通熒光顯微鏡更高對比度、高解析度圖像,同時具有高靈敏度,杰出樣品的保護。
3、多維圖像的獲得。如7維圖像(XYZaλIt):xyt 、xzt 和xt掃描,時間序列掃描、旋轉掃描、區(qū)域掃描、光譜掃描,同時方便進行圖像處理。
4、細胞內離子熒光標記。單標記或多標記,檢測細胞內如PH和鈉、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及動態(tài)變化。
5、熒光標記。探頭標記的活細胞或切片標本的活細胞生物物質,膜標記、免疫物質、免疫反應、受體或配體、核酸等觀察;可以在同一張樣品上同時進行多重物質標記,同時觀察。
6、對細胞檢測無損傷、、可靠和優(yōu)良重復性;數(shù)據(jù)圖像可及時輸出或長期儲存。